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為什么病理檢查要這么久,不能像檢驗科一樣快速出報告?而是要等三四天甚至更久呢?
對于病人和醫(yī)生來說,標(biāo)本(細(xì)胞、組織塊或是器官)離開了病人的身體,便是結(jié)束。但對病理科來說,一份病理報告的旅程才剛剛開始。
總的來說,一張合格的病理切片需要經(jīng)過固定、取材、脫水、透明、浸蠟、包埋、切片、染色等步驟,需要經(jīng)過非常多且繁雜的人工操作,時間至少在十幾小時以上,才能放到顯微鏡下觀察,期間操作的參數(shù)和流程的嚴(yán)格控制,是制片質(zhì)量的關(guān)鍵。
一張合格的病理切片報告是如何誕生的呢?接下來就為你揭秘!
01
標(biāo)本固定/
臨床醫(yī)生將標(biāo)本裝入合適的容器中,并用10%福爾馬林固定標(biāo)本。(福爾馬林是30-40%的甲醛溶液,甲醛就是鼎鼎大名的裝修致癌物。)
根據(jù)標(biāo)本不同的大小,固定時間會有所區(qū)別,標(biāo)本較小固定時間在4-6小時左右,較大的固定時間則要24小時,大的標(biāo)本甚至要進(jìn)一步切開,讓福爾馬林充分浸透標(biāo)本。
若含水量較多(如腦標(biāo)本),則需延長固定時間和保持固定液新鮮;若組織含鈣量高(如骨標(biāo)本),則需要進(jìn)行脫鈣處理,可長達(dá)7天。
良好的固定能保持組織細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)的完整,也能保持組織細(xì)胞的抗原性,幫助做出正確的病理診斷和實驗結(jié)果。
02
取材/
在標(biāo)本固定后,將標(biāo)本切取成合適的大小放進(jìn)塑料包埋盒,以供后續(xù)制片的過程便是取材。
在這一步,取材醫(yī)師會對組織標(biāo)本進(jìn)行觀察和描述,并將具有診斷意義的部位切取下來,切成2x1.5x0.3厘米的大小,比如病變代表性部位、切緣、可疑浸潤或者突破包膜等。放進(jìn)編好號的包埋盒中,按批次進(jìn)行下一步的組織切片操作。
03
.脫水/
脫水是指用溶媒將組織內(nèi)的水分置換的過程,最常用的溶媒是乙醇,用不同濃度的乙醇逐步置換組織中的水。這一過程需要6-12小時。
04
透明/
由于乙醇不能溶于石蠟,要將乙醇替代為一種既能與乙醇混合,又能溶于石蠟的溶劑。由于這一過程中替代的媒介溶液能使組織呈現(xiàn)不同程度的透明度,故稱透明。最常用的是二甲苯,其他還有苯、甲苯、氯仿、環(huán)己酮等(對于日常生活來說,這都沒一個好東西?。_@一過程需要1-1.5小時。
05
浸蠟/
這一步驟是用熔化的石蠟置換出組織中的二甲苯,組織塊由軟變硬,利于切片。這一過程需要3小時,將組織中的水經(jīng)過乙醇、二甲苯替換成石蠟。
06
包埋/
這一步驟是用包埋劑(最常見的是石蠟)將浸過蠟的組織塊制成蠟塊,最大面或者指定觀察的面向下用熔化的石蠟進(jìn)行包埋,待石蠟?zāi)毯笮拚梢?guī)則的方形備用。
07
切片/
看似很簡單,實則不輕松,經(jīng)過包埋制成的組織蠟塊,用切片機制成3-5微米切片的過程。病理科需要對標(biāo)本的固定、取材厚薄、組織大小進(jìn)行嚴(yán)格控制,對脫水、透明浸蠟、包埋、蠟塊修整等步驟的規(guī)范操作才能制作出又薄又平整的切片。
08
染色/
病理學(xué)常規(guī)制片中,最基本的是蘇木精和伊紅染色方法,簡稱HE染色方法,其應(yīng)用廣泛,也是病理診斷、教學(xué)和科研中對組織進(jìn)行形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察中最常使用的方法,同時也是后續(xù)檢測方法的基礎(chǔ)。在這一步驟用時1小時左右,分為細(xì)胞核染色、細(xì)胞質(zhì)染色、分化和返藍(lán),最后再進(jìn)行中性樹膠封固。
至此,經(jīng)歷了“刀山火?!钡穆贸?,一張合格的病理切片才能交到診斷醫(yī)師的手里,進(jìn)行鏡下觀察和診斷,而在鏡下它還將經(jīng)歷一場頭腦風(fēng)暴。